关于抗体的选择

蛋白特异性：针 对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不 是全长表达，则需要注意抗体的免yi原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免 yi原序列，查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点，不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在，不宜一概而论。

怎样选择适合你实验需要的抗体？

（1）样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择zui合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免yi亲和反应。

（2）单多ke隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多ke隆抗体为主，一般单ke隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多ke隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。

   血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响？

（1）细胞生长。我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养，我们的客户以及其它血 清生产商也证明了这一点。

（2）过滤。如果血清中出现大量的沉淀物，血清将很难过滤。一般说来，因为在血清生产时 zui后已经经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理，并且经过了严格的无菌检测，因此不推荐再过 滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清，在大觃模的细胞培养中往往将 血清直接加到培养基中一起过滤。